伊紅染色液(醇溶)
伊紅(Eosin)又稱曙紅,屬人工合成染料中的呫噸類染料,為桃紅色或粉紅色的粉末
伊紅(醇溶)分子式為 C20H8Br4O5,分子量為 649.9。伊紅適宜于蘇木精配合染色以顯示正?;虿±?/span>組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)。伊紅染色液(醇溶)采用*防腐劑,操作簡(jiǎn)單,不使用汞、甲醇等有毒試劑。常用于組織切片或培養(yǎng)細(xì)胞的染色,染色后細(xì)胞漿呈粉紅色或紅色。
1、系列乙醇
2、4%多聚甲醛
操作步驟(僅供參考):
1、樣品處理
a) 對(duì)于石蠟切片:
二甲苯中脫蠟 5~10min。
更換新鮮的二甲苯,再脫蠟 5~10min。無水乙醇 5min。
90%乙醇 min。70%乙醇 2min。蒸餾水 2min。
b) 對(duì)于冰凍切片:
蒸餾水 2min。
c) 對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞:
用 4%多聚甲醛固定 10min 以上。蒸餾水洗滌 2 分鐘。
更換新鮮的蒸餾水,再洗滌 2min。
2、伊紅染色
對(duì)于上述處理好的樣品,伊紅染色液染色 0.5~2min(根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整時(shí)間)。
如果需要直接觀察,可以用 70%乙醇洗滌 2 次。如需脫水、透明后封片按后續(xù)步驟進(jìn)行,70%乙醇洗滌后仍可按照后續(xù)步驟進(jìn)行脫水、透明和封片處理。
注:如果用于免疫組化等染色后的復(fù)染,參考上述步驟在其它染色完成后進(jìn)行伊紅染色。
3、脫水、透明、封片或進(jìn)行其它染色a)脫水、透明、封片:
95%乙醇脫水 2min。
更換新鮮的 95%乙醇再脫水 2min。二甲苯透明 5min。
更換新鮮的二甲苯,再透明 5min。用中性樹膠或其它封片劑封片。顯微鏡下觀察,細(xì)胞漿呈粉紅色或紅色。
b)進(jìn)行其它染色:
如果進(jìn)行免疫熒光染色或進(jìn)行 Hoechst 等熒光染料的染色,在伊紅染色液染色后:
70%乙醇洗滌 2 次,每次 2min。
PBS 或生理鹽水或 TBS 或 TBST 等用于免疫染色或熒光染料染色的溶液浸泡 5min。
進(jìn)行免疫熒光染色或其它熒光染料的染色。
注意事項(xiàng):
1、如果需要脫水、透明和封片處理,需自備二甲苯,中性樹膠或其它封片劑。
2、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
有效期: 12 個(gè)月有效。