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大鼠褪黑激素melatonin 酶聯(lián)免疫/酶免法(ELISA試劑盒)
大鼠褪黑激素melatonin 酶聯(lián)免疫/酶免法(ELISA試劑盒)
更新時(shí)間:2017-08-15
型    號(hào):48T/96T
所屬分類:大鼠ELISA試劑盒
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大鼠褪黑激素melatonin 酶聯(lián)免疫/酶免法(ELISA試劑盒)原裝/分裝等各種品牌價(jià)格檔次的ELISA試劑盒。品種多,質(zhì)量好,靈敏度高。并提供免費(fèi)代檢測(cè)服務(wù)(為您節(jié)省時(shí)間)
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大鼠褪黑激素melatonin 酶聯(lián)免疫/酶免法(ELISA試劑盒)產(chǎn)品概述:

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實(shí)驗(yàn)原理:
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠褪黑素 (melatonin)水平。用純化的大鼠褪黑素 (melatonin)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入褪黑素(melatonin),再與 HRP標(biāo)記的羊抗鼠抗體結(jié)合,形成抗體 -抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物 TMB顯色。TMB在 HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的褪黑素 (melatonin)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在 450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度( OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠褪黑素 (melatonin)濃度。

樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收

集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心

20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)該再

次離心。
3. 尿液:用無(wú)菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存

過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000

轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,

細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心

20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次

離心
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保

存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻

漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后

一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬

上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。

檢測(cè)范圍:

1 ng/L -40 ng/L

保存條件及有效期:
1     2-8℃。
2     6個(gè)月

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