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人肝細胞生長因子（HGF）ELISA實驗原理
英文名稱：Human hepatocyte growth factor,HGF ELISA
1． 采用雙抗體夾心法測定標本中人肝細胞生長因子（HGF）ELISAKit水平。
2. 首先用純化的人肝細胞生長因子（HGF）ELISA Kit抗體包被微孔板，制成固相抗體。
3. 然后往包被單抗的微孔中依次加入肝細胞生長因子（HGF）ELISAKit，再與HRP標記的肝細胞生長因子（HGF）ELISAKit抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成 藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。
4. 顏色的深淺和樣品中的肝細胞生長因子（HGF）ELISAKit呈正相關(guān)。
5. zui后用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算出樣品中人肝細胞生長因子（HGF）ELISAKit濃度
。
目的：測定人的血清，血漿及相關(guān)液體樣本中肝細胞生長因子（HGF）ELISAKit的含量。
6. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。
7. 血漿：應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）去除顆粒。仔細收集上清，如有沉淀，再次離心。
安全性：
1． 避免直接接觸終止液和底物。如不小心接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。
2． 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3． 不要用嘴接觸試劑盒里的任何成份。
4 Elisa試劑盒請遠離兒童
自備物品：
1 、 37 ℃ 恒溫箱
2 、 標準規(guī)格酶標儀
3 、 精密移液器及一次性吸頭
4 、 蒸餾水
5 、 一次性試管
6 、 吸水紙
保存條件及有效期：
1．試劑盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6個月
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