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人肝細胞生長因子(HGF)ELISA實驗原理
點擊次數(shù):1410 更新時間:2010-10-03

人肝細胞生長因子(HGF)ELISA實驗原理

 

 

 

英文名稱:Human hepatocyte growth factor,HGF ELISA

1 采用雙抗體夾心法測定標本中人肝細胞生長因子(HGF)ELISAKit水平。

2. 首先用純化的人肝細胞生長因子(HGF)ELISA Kit抗體包被微孔板,制成固相抗體。

3. 然后往包被單抗的微孔中依次加入肝細胞生長因子(HGF)ELISAKit再與HRP標記的肝細胞生長因子(HGF)ELISAKit抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMBHRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成    藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。

4. 顏色的深淺和樣品中的肝細胞生長因子(HGF)ELISAKit呈正相關(guān)。

5.  zui后用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算出樣品中人肝細胞生長因子(HGF)ELISAKit濃度

。

目的:測定人的血清,血漿及相關(guān)液體樣本中肝細胞生長因子(HGF)ELISAKit的含量。

 

6. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。

7. 血漿:應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)去除顆粒。仔細收集上清,如有沉淀,再次離心。

安全性:
1
 避免直接接觸終止液和底物。如不小心接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
2
 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3
 不要用嘴接觸試劑盒里的任何成份。

4   Elisa試劑盒請遠離兒童

自備物品:

1 37 ℃ 恒溫箱

2 、 標準規(guī)格酶標儀

3 、 精密移液器及一次性吸頭

4 、 蒸餾水

5 、 一次性試管

6 、 吸水紙

 

保存條件及有效期:

1.試劑盒保存:;2-8℃。

2.有效期:6個月

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