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人腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒實驗原理
點擊次數(shù):1515 更新時間:2010-09-24

人腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒實驗原理

 

 

1 采用雙抗體夾心法測定標本中人腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISAKit水平。

2. 首先用純化的人腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISAKit抗體包被微孔板,制成固相抗體。

3. 然后往包被單抗的微孔中依次加入腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISAKit,再與HRP標記的腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISAKit抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMBHRP酶的催化下轉化成    藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。

4. 顏色的深淺和樣品中的腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISAKit呈正相關。

5.  zui后用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算出樣品中人腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISAKit濃度

。

目的:測定人的血清,血漿及相關液體樣本中腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISAKit的含量。

 

6. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。

7. 血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000/分)去除顆粒。仔細收集上清,如有沉淀,再次離心。

安全性:
1
 避免直接接觸終止液和底物。如不小心接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
2
 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3
 不要用嘴接觸試劑盒里的任何成份。

4   Elisa試劑盒請遠離兒童

自備物品:

1 、 37 ℃ 恒溫箱

2 、 標準規(guī)格酶標儀

3 、 精密移液器及一次性吸頭

4 、 蒸餾水

5 、 一次性試管

6 、 吸水紙

 

保存條件及有效期:

1.試劑盒保存:;2-8℃。

2.有效期:6個月

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