腸桿菌是原核生物,只有核糖體,只能形成多肽(肽鏈)。而胰島素是蛋白質(zhì),利用大腸桿菌等微生物表達(dá)生產(chǎn)胰島素的過程中,表達(dá)產(chǎn)物常常形成包涵體,而不是分泌出來。要通過變性和復(fù)性過程才能得到有活性的人胰島素。
通過基因工程,將人胰島素基因A、B鏈的人工合成基因分別組合到大腸桿菌的不同質(zhì)粒上,然后再移至菌體內(nèi),這種重組質(zhì)粒在大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行正常的復(fù)制和表達(dá),從而使帶有A、B鏈基因的工程菌株分別產(chǎn)生人胰島素A、B鏈,然后再用人工的方法,在體外通過二硫鍵使這2條鏈連接成有活性的人胰島素?,F(xiàn)在大都已經(jīng)改為用酵母菌、昆蟲培養(yǎng)細(xì)胞、或哺乳動物培養(yǎng)細(xì)胞等真核細(xì)胞作為表達(dá)載體,可以直接分泌胰島素。