国产成人精品综合在线_成年女人免费观看这视频_久久伊人黄色网站免费_国产麻豆激情无码视频

當(dāng)前位置:
首頁 > 技術(shù)文章 > 三聚氰胺(奶粉)快速檢測試劑盒說明書
目錄導(dǎo)航 Directory
技術(shù)支持Article
三聚氰胺(奶粉)快速檢測試劑盒說明書
點擊次數(shù):2292 更新時間:2020-11-30

三聚氰胺

快速檢測試劑盒說明書

一、原理

本試劑盒采用間接競爭ELISA方法,在微孔條上預(yù)包被偶聯(lián)抗原,樣本中的殘留物三聚氰胺將和微孔條上預(yù)包被的偶聯(lián)抗原競爭抗三聚氰胺抗體,加入酶標(biāo)記物后,用TMB底物顯色,樣本吸光值與其所含殘留物三聚氰胺的含量成負(fù)相關(guān),與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較即可得出相應(yīng)殘留物三聚氰胺的含量。

二、試劑盒特性

  • 試劑盒靈敏度:   0.5ppb
  • 孵育溫度:       25
  • 孵育時間:       30min15min
  • 樣本檢測下限

生鮮乳、液態(tài)奶 ···································  5 ppb

酸奶、奶粉 ········································  10ppb

  • 交叉反應(yīng)率

三聚氰胺  ·········································  100%

  • 樣本回收率

生鮮乳、液態(tài)奶 ···························   90% ±25%

酸奶、奶粉 ·································   80% ±25%

三、試劑盒組成

1

微量測試孔

每條8孔,一板12條

2

標(biāo)準(zhǔn)液×6瓶

(1ml/瓶)

0ppb

0.5ppb

1.5ppb

4.5ppb

13.5ppb

40.5ppb

3

酶標(biāo)記物

7ml

紅色帽

4

抗體工作液

7ml

藍(lán)色帽

5

底物A液

7ml

白色帽

6

底物B液

7ml

黑色帽

7

終止液

7ml

黃色帽

8

20X濃縮洗滌液

15ml

白色帽

9

20X樣本提取

50ml

透明

10

5X樣品稀釋液

50ml

藍(lán)色帽

四、所用儀器、試劑

具備的儀器:酶標(biāo)儀、振蕩器、離心機、刻度移液管、天平(感量0.01g

微量移液器:單道 20µl200µl、單道100µl1000µl、多道 30300 µl

五、樣本前處理步驟

  • 樣本處理前須知

a)實驗中必須使用一次性吸頭,吸取不同試劑時要更換吸頭。

b)實驗之前須檢查各種實驗器具是否干凈,必要時可對實驗器具進(jìn)行清潔,以避免污染干擾實驗結(jié)果。

  • 需配置的試劑

試劑1:樣本提取液

   將20X樣本提取與去離子水1:19稀釋備

   用。

試劑2:樣品稀釋液

   將5X樣品稀釋與去離子水1:4稀釋備用。

  • 樣本處理:

a牛奶(純牛奶、生鮮乳等液體奶)樣本處理

  • 取新鮮的牛奶樣本50µl用于分析。

樣本稀釋倍數(shù):  1 

備注:較為粘稠的酸奶、煉乳制品無法使用此方法檢測。

b奶粉樣本處理

  • 1g新鮮奶粉樣本于50ml離心管中;加入10ml樣本提取液,渦旋振蕩3min,4000r/min以上,室溫離心10min;
  • 50µl液體用于分析。

樣本稀釋倍數(shù):  10 

c酸奶樣本處理

  • 1g新鮮酸奶樣本于10ml/15ml/50ml離心管中;加入5ml樣品稀釋液,渦旋振蕩1min,靜置10min;
  • 50µl液體用于分析。

    樣本稀釋倍數(shù):  5 

六、 酶標(biāo)免疫分析程序:

  • 測定前應(yīng)須知:
  • 使用前將需用試劑和板條的溫度回升至室溫(2025)。
  • 使用之后立即將所有試劑放回28。
  • ELISA分析中的再現(xiàn)性,很大程度上取決于洗板的一致性,正確的洗板操作是ELISA測定程序中的要點。
  • 所有恒溫孵育過程,避免光線照射,用蓋板膜蓋住微孔板。
  • 操作步驟:
  • 28冷藏環(huán)境中取出所需試劑,室溫(2025)平衡30min以上,注意每種液體試劑使用前均須搖勻。
  • 取出框架及需要數(shù)量的微孔,將不用的微孔放入自封袋,保存于2-8。
  • 配液:將15ml 20X濃縮洗滌液用去離子水稀釋至800ml。
  • 編號:將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對應(yīng)微孔按序編號,每個樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行,并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。
  • 加標(biāo)準(zhǔn)品/樣品50µl/孔到各自的微孔中,加入酶標(biāo)記物50µl/孔,然后再加入抗體工作液50µl/孔,用蓋板膜封板,25環(huán)境中反應(yīng)30min
  • 將孔內(nèi)液體甩干,用已稀釋的洗滌液250µl/孔洗板56次,每次間隔1530秒,用吸水紙拍干(拍干后未清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破)。
  • 顯色:加入底物A50µl/孔,再加入底物B50µl/孔,輕輕振蕩混勻,25環(huán)境中避光顯色15min。
  • 測定:加入終止液50µl/孔,輕輕振蕩混勻,設(shè)定酶標(biāo)儀于450nm處(建議用雙波長450/630nm檢測,5min內(nèi)讀數(shù)),測定每孔OD值。

七、結(jié)果判定

結(jié)果判定有兩種方法,粗略判定可用第1種方法,定量判定用第2種方法。注意樣本吸光度值與其所含三聚氰胺量成負(fù)相關(guān)。

1、粗略判定:

用樣本的平均吸光度值與標(biāo)準(zhǔn)值比較即可得出其濃度范圍(ng/ml)。假設(shè)樣本1的吸光度值為0.3,樣本2的吸光度值為1.0,標(biāo)準(zhǔn)液吸光度值分別是:0ppb2.043; 0.5ppb1.5541.5ppb1.015;4.5ppb0.474;13.5ppb0.151;40.5ppb0.055。則樣本1的濃度范圍是4.5ppb13.5ppb;樣本2的濃度范圍是1.5ppb4.5ppb,乘以其對應(yīng)的稀釋倍數(shù)即為樣本中三聚氰胺實際濃度。

2、定量分析

1)百分吸光率的計算,標(biāo)準(zhǔn)品或樣本的百分吸光率等于標(biāo)準(zhǔn)品或樣本的百分吸光度值的平均值(雙孔)除以第--個標(biāo)準(zhǔn)(0標(biāo)準(zhǔn))的吸光度值,再乘以100%,即

百分吸光度值(%)=

B

×100%

B0

B—標(biāo)準(zhǔn)溶液或樣本溶液的平均吸光度值

B0—0ng/ml標(biāo)準(zhǔn)溶液的平均吸光度值

2)標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制與計算

以標(biāo)準(zhǔn)品百分吸光率為縱坐標(biāo),以三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)品濃ng/ml)的半對數(shù)為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。將樣本的百分吸光率代入標(biāo)準(zhǔn)曲線中,從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出樣本所對應(yīng)的濃度,乘以其對應(yīng)的稀釋倍數(shù)即為樣本中三聚氰胺實際濃度。

若利用試劑盒專業(yè)分析軟件進(jìn)行計算,更便于大量樣本的準(zhǔn)確、快速分析。

八、 注意事項

  • 室溫低于25或試劑及標(biāo)本未回到室溫(2025)會導(dǎo)致所有標(biāo)準(zhǔn)的OD值偏低。
  • 在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況,則會伴隨著標(biāo)準(zhǔn)曲線不成線性,重復(fù)性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作。
  • 混合要均勻,否則會出現(xiàn)重復(fù)性不好的現(xiàn)象。
  • 反應(yīng)終止液為2M硫酸,避免接觸皮膚。
  • 不要使用過了有效日期的試劑盒;稀釋或攙雜使用會引起靈敏度、OD值變化;不要交換使用不同批號的盒中試劑。
  • 不用的微孔板放進(jìn)自封袋重新密封;標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和無色的發(fā)色劑對光敏感,因此要避免直接暴露在光線下。
  • 顯色液若有任何顏色表明變質(zhì),應(yīng)當(dāng)棄之。標(biāo)準(zhǔn)品1的吸光度值小于0.5時,表示試劑可能變質(zhì)。
  • 該試劑盒Z佳反應(yīng)溫度為25,溫度過高或過低將導(dǎo)致檢測吸光度值和靈敏度發(fā)生變化。

九、儲藏條件和保質(zhì)期

  • 儲藏條件:試劑盒于28保存,不要冷凍。
  •  質(zhì) 期:該產(chǎn)品有效期為1年,生產(chǎn)日期見包裝盒。

提示:酶標(biāo)板真空包裝袋若有漏氣,酶標(biāo)板仍然正常有效,不影響實驗結(jié)果,請放心使用。

 萊克多巴胺快速檢測試劑盒說明書

新霉素快速檢測試劑盒

慶大霉素快速檢測試劑盒說明書

滬公網(wǎng)安備 31011802001678號