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SDS-PAGE分離膠緩沖液(4×)說(shuō)明書(shū)
點(diǎn)擊次數(shù):3289 更新時(shí)間:2020-10-15

 SDS-PAGE分離膠緩沖液(4×)說(shuō)明書(shū)

Separating Gel Solution (4×)

 

目錄號(hào):K0026

 

 

保存條件:2-8℃保存。

 

 

組分說(shuō)明

 

                      Cat No.          K0026A

                      Volume             500 ml

 

 

             本產(chǎn)品僅供科研使用,請(qǐng)勿用于臨床診斷及其他用途  

 

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

 

  本產(chǎn)品為配制 SDS-PAGE分離膠緩沖液,可用于配制各種濃度的變性及非變性

PAGE凝膠,方便、快捷。產(chǎn)品中已加入10%SDS,使用時(shí)不用另外加入。

 

操作步驟

 

根據(jù)目的蛋白分子量大小選擇合適的PAGE分離膠配制濃度,Z佳膠濃度請(qǐng)參考附表1。

 I 灌制分離膠(各試劑使用量請(qǐng)參考附表2)

1.參照凝膠模具說(shuō)明書(shū),裝配好凝膠模具。

 

   注:加入上層篩板有助于加樣時(shí)保持填料與樣品均勻接觸,是否加入上層篩板可根據(jù)實(shí)際情況選擇。

2.將不同體積的30%Acr-Bis(29:1)、分離膠緩沖液和雙蒸水在小燒杯或試管中混合。

3.加入10%APS和TEMED,輕輕攪拌使其混勻,避免產(chǎn)生氣泡。

4.在凝膠模具中灌入適量分離膠溶液(對(duì)于 mini-gel,凝膠液加至約距前玻璃板頂端

   1.5 cm或距梳齒約0.5 cm即可),然后在分離膠溶液上輕輕覆蓋一層1-5 cm的水層,

   使凝膠表面保持平整。

 

5.靜置30-60分鐘,待分離膠和水層之間出現(xiàn)一個(gè)清晰的界面后,表面凝膠已聚合。

 

 II灌制濃縮膠(各試劑使用量請(qǐng)參考附表3)

1.去除覆蓋在分離膠上的水層。

2.將不同體積的30%Acr-Bis(29:1)、濃縮膠緩沖液和雙蒸水在一個(gè)小燒杯或試管中混

   合。

3.加入10%過(guò)硫酸銨和TEMED,輕輕攪拌使其混勻,避免產(chǎn)生氣泡。

4.將濃縮膠溶液加至分離膠的上面,直至凝膠溶液到達(dá)前玻璃板的頂端。

5.將梳子插入凝膠內(nèi),避免產(chǎn)生氣泡。

6.靜置10~20分鐘,等待濃縮膠聚合。

7.待凝膠聚合后,小心地拔出梳子,以免破壞加樣孔。

8.進(jìn)行常規(guī)電泳操作。

 

 附表

 

                     附表1. SDS-PAGE分離膠的濃度與J分離范圍

 

                      SDS-PAGE分離膠濃度                理想分離范圍

                               6%膠                         50-150 kD

                               8%膠                          30-90 kD

                              10%膠                          20-80 kD

                              12%膠                          12-60 kD

                              15%膠                          10-40 kD

 

實(shí)驗(yàn)代做服務(wù):

 

WB代做

HE染色

免疫熒光染色

蛋白相互作用分析

ELISA免費(fèi)代檢測(cè)

免疫組化

熒光定量PCR

番紅O固綠染色

流式細(xì)胞檢測(cè)

激光共聚焦

透射電鏡服務(wù)

DNA甲基化實(shí)驗(yàn)

免疫共沉淀(Co-IP)

DNA甲基化

掃描電鏡實(shí)驗(yàn)

microRNA 測(cè)序

半定量RT-PCR

分子克隆和質(zhì)粒載體構(gòu)建服務(wù)

原位雜交(FIsh)

石蠟/冰凍切片

RNA結(jié)合蛋白免疫沉淀(RIP

CCK8檢測(cè)

蛋白雙向(2-D)電泳

蛋白雙向2D-WB

ATP/ADP檢測(cè)

Taqman探針

細(xì)胞劃痕

基因組DNA提取

 

 

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