機(jī)體的特異性免疫反應(yīng)
當(dāng)外來(lái)的抗原物質(zhì)進(jìn)入機(jī)體后,機(jī)體在抗原物質(zhì)刺激下,產(chǎn)生細(xì)胞免疫和體液免疫的過(guò)程,就是機(jī)體的特異性免疫反應(yīng)。一定量的抗原物質(zhì)進(jìn)入機(jī)體后,如何使機(jī)體的免疫器官和免疫細(xì)胞發(fā)生特異性免疫反應(yīng)(包括細(xì)胞免疫與體液免疫)產(chǎn)生特異性抗體呢?
抗原初次進(jìn)入機(jī)體后,立即被巨噬細(xì)胞所吞噬,大多被分解為免疫碎片,再與巨噬細(xì)胞的mRNA結(jié)合形成復(fù)合體,從吞噬細(xì)胞內(nèi)釋放出來(lái)。這種被吞噬細(xì)胞處理過(guò)的抗原,刺激T細(xì)胞和B細(xì)胞,使它們大部分分別轉(zhuǎn)化為淋巴母細(xì)胞和漿母細(xì)胞,從而產(chǎn)生出更多的致敏淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞,其中一部分受抗原刺激后中途停止分化,而成為記憶細(xì)胞,這些記憶細(xì)胞在抗原刺激終止后數(shù)月甚至數(shù)年,還能與再次進(jìn)入機(jī)體的相同抗原起繼發(fā)性免疫反應(yīng)。
T細(xì)胞受到抗原刺激后,便轉(zhuǎn)化為淋巴母細(xì)胞和致敏淋巴細(xì)胞,再次接確同種抗原,可產(chǎn)生巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子、巨噬細(xì)胞武裝因子和淋巴毒素等各種淋巴激活素,形成細(xì)胞免疫反應(yīng)。
B細(xì)胞受到抗原刺激后,就增生分化成漿母細(xì)胞和漿細(xì)胞,產(chǎn)生并分泌特異性抗體(免疫球蛋白),形成體液免疫反應(yīng)。
當(dāng)然,抗原進(jìn)入機(jī)體后,與機(jī)體免疫活性細(xì)胞起作用的僅是一部分,還有一部分被機(jī)體代謝器官所排除。
抗原與淋巴細(xì)胞接觸產(chǎn)生免疫反應(yīng)的方式有多種:抗原可先與巨噬細(xì)胞作用,然后再傳遞給淋巴細(xì)胞,也可直接與淋巴細(xì)胞(包括T細(xì)胞和B細(xì)胞)作用,發(fā)生免疫反應(yīng)??乖镔|(zhì)刺激機(jī)體后,抗體的產(chǎn)生有一定的規(guī)律,即抗原進(jìn)入機(jī)體后,首先經(jīng)過(guò)一段潛伏期,然后抗體含量逐漸增多,達(dá)到高峰后,暫時(shí)維持一定的時(shí)間,以后抗體含量又逐步下降,完成初次反應(yīng)的階段。當(dāng)同樣的抗原第二次再刺激機(jī)體后,抗體含量上升速度比初次反應(yīng)速度快,并且峰值也較前次為高,高峰持續(xù)時(shí)間也較長(zhǎng),形成再次反應(yīng)階段。
如果在抗體含量為zui高時(shí),一般情況就能得到價(jià)的抗血清,經(jīng)過(guò)采血,如不注射同樣抗原,機(jī)體產(chǎn)生抗體的能力就會(huì)日漸下降,但是,如果動(dòng)物休息相當(dāng)長(zhǎng)的時(shí)間,例如2-3個(gè)月后,再次注射同樣的少量抗原,它的抗體含量會(huì)很快上升,能重新獲得價(jià)抗血清。機(jī)體的特異性免疫反應(yīng)與抗體的形成直接相關(guān),因此,注意在抗原刺激下影響機(jī)體產(chǎn)生抗體的因素尤為重要。
應(yīng)特別注意選擇合適的動(dòng)物。免疫有物動(dòng)物,年齡、體重和性別均要考慮。作為免疫用的動(dòng)物年齡太小,免疫系統(tǒng)發(fā)育還不健全,會(huì)影響抗體的形成;年齡太大因代謝機(jī)能衰弱,也會(huì)影響抗體的形成。因此,對(duì)于實(shí)驗(yàn)室常用的家兔選擇兔齡為9-24個(gè)月,體重為2-2.5kg,耳朵大,靜脈粗,無(wú)腳癬的健康雄性白兔。
采用合適抗原劑量??乖瓌┝刻?,會(huì)產(chǎn)生免疫麻痹;太小,會(huì)無(wú)法刺激機(jī)體反應(yīng),并且多次低劑量注射所造成的免疫麻痹,比一次大劑量所造成的免疫麻痹要嚴(yán)重得多,均不利于抗體的形成。對(duì)于抗原刺激B細(xì)胞的反應(yīng)來(lái)說(shuō),要使B細(xì)胞產(chǎn)生大量抗體,就必須注射合適的抗原劑量。
挑選合適的注射途徑和部位。抗原進(jìn)入機(jī)體的途徑多種多樣,例如肌肉、皮內(nèi)、皮下、淋巴結(jié)、靜脈、腳掌和腹腔內(nèi)等。經(jīng)常采用的有兩種途徑:一種肌肉注射,另一種是靜脈注射,如果兩種途徑交替使用,那么應(yīng)先靜脈注射后肌肉注射,這樣有利于機(jī)體產(chǎn)生價(jià)的抗體。對(duì)于某一途徑,例如,肌肉注射時(shí),常在不同肌肉部位進(jìn)行多點(diǎn)注射,免疫效果也較好。采用什么途徑注射,與抗原的性質(zhì)有關(guān),對(duì)于某些病毒例如蕪菁花葉病毒,由于在純化時(shí)加入了許多化學(xué)物質(zhì)就不適宜靜脈注射。另外,為了防止動(dòng)物的注射點(diǎn)發(fā)火,一般每個(gè)注射點(diǎn)的劑量不應(yīng)大于0.5ml.
輔之合適的佐劑。為了使抗原在機(jī)體內(nèi)慢慢釋放出來(lái),延長(zhǎng)抗原在機(jī)體內(nèi)的停留時(shí)間,從而使產(chǎn)生抗體的初次反應(yīng)和再次反應(yīng)結(jié)合在一起,常常在抗原中加入佐劑,并與抗原充分混合,一起注入動(dòng)物體內(nèi)。常用的佐劑有:福氏佐劑(Freund's adjuvant)和明礬佐劑。福氏佐劑由石蠟油和羊毛脂混合而成,它們的比例要按情況而定。福氏佐劑又分為*和非*兩種。所謂*福氏佐劑就是在福氏佐劑中加入熱滅活的分枝桿菌,例如卡介苗或酪酐菌等,否則,就是非*福氏佐劑。使用福氏佐劑時(shí)一定要使油包水的過(guò)程(即乳化)*,否則就不能起佐劑作用。明礬佐劑不好福氏佐劑常用,但當(dāng)實(shí)驗(yàn)室缺乏羊毛脂,或者在加入某一病毒后佐劑難以乳化時(shí),明礬佐劑也可以采用(配方參閱附錄)。用于人類(lèi)的佐劑通常以抗原沉淀物的形式吸附在硫酸鋁鉀或氫氧化鋁上,加入滅活的百日咳博德特氏菌來(lái)提高抗原的免疫性。